Investigação parasitológica e molecular de Toxoplasma gondii em urina e saliva de felinos (Felis catus) infectados experimentalmente

28 de junho de 2020

Parasitological and molecular investigation of Toxoplasma gondii in urine and saliva of experimentally infected cats (Felis catus).

Investigación parasitológica y molecular de Toxoplasma gondii en orina y saliva de gatos
(Felis catus) infectados experimentalmente.

Autores

Weslen Fabricio Pires Teixeira, Maria Eduarda Gonçalves Tozato, Giovana Pavão Vital, Welber Daniel Zanetti Lopes, Samea Fernandes Joaquim, Amanda Leal de Vasconcellos, Flávia Carolina Fávero, Lívia Mendonça Pascoal, Gustavo Felippelli, Helio Langoni, Kátia Denise Saraiva Bresciani, Alvimar José da Costa.

Resumo

O objetivo do estudo foi investigar a presença de Toxoplasma gondii em amostras de urina e saliva colhidas de felinos experimentalmente infectados, fato inédito na literatura consultada. Seis felinos machos, sorologicamente negativos (IgG) para T. gondii, foram distribuídos em dois grupos, sendo quatro inoculados com 2x105 taquizoítos (Cepa RH) via subcutânea (GI), e dois mantidos como controle (GII). Anteriormente à inoculação (dias -7 e 0) e no 7º, 14º, 21º,
28º, 42º, 56º e 70º dia pós-inoculação (DPI), os felinos foram anestesiados com tiletamina + zolazepam (na dose de 15 mg/kg,via intramuscular), sendo colhidas amostras de urina, saliva e sangue. Nas amostras sanguíneas obtidas após a inoculação, pesquisou-se a presença de anticorpos anti-T. gondii (IgG) pela reação de imunofluorêscencia indireta (RIFI). A parasitemia pelo T. gondii foi avaliada por meio de inoculações intraperitoneais em camundongos albinos (bioensaio). A pesquisa do T. gondii nas amostras de urina e saliva foram realizadas pelas técnicas de nested PCR e bioensaio em camundongos. Todos os felinos inoculados com T. gondii (GI) soroconverteram à infecção toxoplásmica, diferentemente dos felinos do não inoculados (GII), que permaneceram negativos durante todo estudo. Diagnosticou-se parasitemia pelo T. gondii em todos felinos do grupo I, totalizando cinco eventos entre o 7° e 42º DPI. Em nenhuma amostra de urina e saliva dos felinos GI e GII, diagnosticou-se a presença de T. gondii. Observou-se que felinos infectados experimentalmente com taquizoítos da cepa RH (isolado I) de T. gondii, podem não eliminar formas infectantes do parasito pela urina e saliva.

Palavras chaves:

Gatos; Imunofluorescência; Protozoário; Toxoplasmose.

Abstract:

The present study aimed to investigate the presence of Toxoplasma gondii in urine and saliva samples collected from experimentally infected cats, an unprecedented fact in consulted literature. Six felines, males, serologically negative (IgG) for T. gondii were selected and divided into two experimental groups. Four cats were inoculated with 2x105 tachyzoites (RH strain) (Group I), and two cats were kept as control group (Group II). Before inoculation (days -7 and 0) and on the 7
th, 14th, 21th, 28th, 42th, 56th and 70th post inoculation days (PID), all animals were anesthetized with tiletamine hydrochloride and zolazepam (dosage of 15 mg/Kg) for sampling of urine, saliva and blood. Detection of serological titers was performed by indirect immunofluorescence (IIF) and the detection of the protozoan in the bloodstream of cats (parasitemia) was performed by mouse bioassay. The detection of T. gondii in urine and saliva samples was performed using nested PCR and mouse bioassay. All cats inoculated with T. gondii (GI) seroconverted, different from felines of the GII (control), which remained negative throughout the study. T. gondii parasitemia was diagnosed in all cats in group I,
totaling five events between the 7th and 42nd PID. It was not possible to detect T. gondii in urine and saliva from infected and control group with nested PCR or mouse bioassay. It was observed that felines experimentally infected with tachyzoites of the strain RH (isolate I) of T. gondii, may not eliminate infectious forms of the parasite through urine and saliva.

Keywords:

Cats; Immunofluorescence; Protozoan; Toxoplasmosis.

Resumen:

El objetivo del estudio fue investigar la presencia de Toxoplasma gondii en muestras de orina y saliva tomadas de gatos infectados experimentalmente, un hecho sin precedentes en la literatura consultada. Se distribuyeron seis felinos machos serológicamente negativos (IgG) para T. gondii en dos grupos, cuatro fueron inoculados con 2x105 taquizoitos (Cepa RH) por vía subcutánea (GI), y dos se mantuvieron como controles (GII). Antes de la inoculación (días -7 y 0) y en el 7º, 14º, 21º, 28º, 42º, 56º y 70º día posterior a la inoculación (DPI), los gatos fueron anestesiados con tiletamina + zolazepam (a una dosis de 15 mg / kg, por vía intramuscular), y se recogieron muestras de orina, saliva y sangre. En las muestras de sangre obtenidas después de la inoculación, se investigó la presencia de anticuerpos anti-T. gondii (IgG) por la reacción de inmunofluorescencia indirecta (RIFI). La parasitemia de T. gondii se evaluó mediante inoculaciones intraperitoneales en ratones albinos (bioensayo). La búsqueda de T. gondii en muestras de orina y saliva se realizó mediante PCR anidada y bioensayo en ratones. Se encontró que todos los gatos inoculados con T. gondii (GI) seroconvirtieron a infección toxoplásmica, a diferencia de los gatos no inoculados (GII), que permanecieron negativos durante todo el estudio. Se diagnosticó parasitemia por T. gondii en todos los gatos del grupo I, totalizando cinco eventos entre el 7 ° y 42 ° DPI. En ninguna muestra de orina y saliva de los felinos GI y GII, se diagnosticó la presencia de T. gondii. Se observó que los
felinos infectados experimentalmente con taquizoitos de la cepa RH (aislado I) de T. gondii, pueden no eliminar las formas infecciosas del parásito a través de la orina y la saliva.

Palabras claves:

Gatos; Inmunofluorescencia; Protozoos; Toxoplasmosis.

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